ICS
07.140
CCS
C06 SF
中華人民共和國(guó)司法行政行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
SF/T 0176—2024
代替 SF/Z JD0107024—2018
尿液、毛發(fā)中S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的液相色譜-質(zhì)譜檢驗(yàn)方法
Determination of S(+)-methamphetamine, R(-)-methamphetamine, S(+)-amphetamine, and R(-)-amphetamine in urine and hair by liquid chromatography-mass spectrometry
2024 - 12 - 30發(fā)布
2025 - 06 - 01實(shí)施
中華人民共和國(guó)司法部 發(fā)布
SF/T 0176—2024
I
目次
前言 ................................................................................. II
1 范圍 ............................................................................... 1
2 規(guī)范性引用文件 ..................................................................... 1
3 術(shù)語(yǔ)和定義 ......................................................................... 1
4 原理 ............................................................................... 1
5 試劑、儀器和設(shè)備 ................................................................... 1
6 定性分析 ........................................................................... 2
7 定量分析 ........................................................................... 3
8 分析結(jié)果評(píng)價(jià) ....................................................................... 5
附錄A（資料性） S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的相關(guān)資料 .................................................................................. 6
附錄B（資料性） 目標(biāo)物的相關(guān)信息及方法線性范圍、檢出限與定量限 ....................... 7
SF/T 0176—2024
II
前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
本文件代替SF/Z JD0107024—2018《尿液、毛發(fā)中S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法》，與SF/Z JD0107024—2018相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：
a)
增加了“S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的相關(guān)資料”（見(jiàn)附錄A）；
b)
增加了目標(biāo)物的“CAS號(hào)”（見(jiàn)附錄B）。
請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。
本文件由司法鑒定科學(xué)研究院提出。
本文件由司法部信息中心歸口。
本文件起草單位：司法鑒定科學(xué)研究院、中國(guó)政法大學(xué)、中國(guó)刑事警察學(xué)院。
本文件主要起草人：嚴(yán)慧、趙君博、劉偉、王元鳳、郝紅霞、朱昱、向平、王鑫、沈保華、沈敏、紀(jì)佼佼、吳何堅(jiān)。
本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：
——
2018年首次發(fā)布為SF/Z JD0107024—2018；
——
本次為第一次修訂。
SF/T 0176—2024
1
尿液、毛發(fā)中S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的液相色譜-質(zhì)譜檢驗(yàn)方法
1 范圍
本文件描述了尿液、毛發(fā)中S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢驗(yàn)方法，包括原理，試劑、儀器和設(shè)備，定性分析，定量分析以及分析結(jié)果評(píng)價(jià)。
本文件適用于尿液、毛發(fā)中S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的定性分析和定量分析。
2 規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
GA/T 122 毒物分析名詞術(shù)語(yǔ)
3 術(shù)語(yǔ)和定義
GA/T 122界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
4 原理
尿液和毛發(fā)經(jīng)甲醇稀釋、提取后，利用手性色譜柱分離，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)與平行操作的空白樣品和添加樣品作對(duì)照，以保留時(shí)間、質(zhì)譜特征離子對(duì)峰和離子對(duì)豐度比進(jìn)行定性分析；以定量離子對(duì)峰面積比值為依據(jù)，采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析。
5 試劑、儀器和設(shè)備 試劑
試驗(yàn)用水應(yīng)為符合GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。所用試劑包括如下。
a)
甲醇：色譜純。
b)
冰醋酸：分析純。
c)
氨水：含量25%，分析純。
d)
丙酮：色譜純。
e)
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液：
1)
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備溶液：市售S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液，質(zhì)量濃度均為100 μg/mL。密封，置于冰箱中冷凍保存，有效期12個(gè)月；
2)
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液：試驗(yàn)中所用其他濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液均由符合5.1 e）1）的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備溶液用甲醇稀釋得到。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3個(gè)月。
f)
內(nèi)標(biāo)溶液：
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2
1)
內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液：精密稱(chēng)取4-苯基丁胺（或其他合適內(nèi)標(biāo)物）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，用甲醇配制成1.0 mg/mL的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液。密封，置于冰箱中冷凍保存，有效期12個(gè)月，或采用市售標(biāo)準(zhǔn)溶液；
2)
內(nèi)標(biāo)工作溶液：10 ng/mL的內(nèi)標(biāo)工作溶液由符合5.1 f）1）的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液用甲醇稀釋得到。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期3個(gè)月。 儀器和設(shè)備
儀器和設(shè)備及要求如下。
a)
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。
b)
電子天平：分度值≤0.1 mg。
c)
離心機(jī)。
d)
超聲波清洗儀。
e)
聚四氟乙烯濾膜：0.22 μm。
f)
冷凍研磨儀。
g)
移液器。
6 定性分析 樣品前處理
6.1.1 檢材樣品
6.1.1.1 尿液樣品
取尿液20 μL，加入內(nèi)標(biāo)工作溶液980 μL，渦旋混勻，12000 r/min離心3 min，取上清液，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析。
6.1.1.2 毛發(fā)樣品
依次用適量的水和丙酮將毛發(fā)樣品振蕩洗滌兩次，晾干后剪成約1 mm段，稱(chēng)取毛發(fā)樣品20 mg于研磨管中，加研磨珠適量，再加內(nèi)標(biāo)工作溶液1 mL，置冷凍研磨儀中粉碎，冰浴超聲30 min，12000 r/min離心3 min，取上清液，經(jīng)濾膜過(guò)濾，濾液供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析。
6.1.2 空白樣品
移?。ɑ蚍Q(chēng)?。┛瞻啄蛞?0 μL（或空白毛發(fā)20 mg）作為空白樣品，按6.1.1.1（或6.1.1.2）的方法，與檢材樣品平行操作。
6.1.3 添加樣品
移取0.05 μg/mL的添加尿液20 μL（或稱(chēng)取0.1 ng/mg的添加毛發(fā)20 mg），按6.1.1.1（或6.1.1.2）的方法，與檢材樣品平行操作。 儀器檢測(cè)
6.2.1 儀器條件
6.2.1.1 液相色譜條件
以下為參考條件，可根據(jù)不同品牌儀器等實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。
a)
色譜柱：萬(wàn)古霉素鍵合柱（250 mm×2.1 mm，5 μm）或其他等效柱。
b)
流動(dòng)相：含0.1%冰醋酸和0.02%氨水的甲醇溶液。
c)
流速：0.25 mL/min。
d)
柱溫：室溫。
e)
進(jìn)樣量：20 μL。
6.2.1.2 質(zhì)譜條件
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3
6.2.1.2.1
以下為參考條件，可根據(jù)不同品牌儀器等實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。
a)
離子源：電噴霧電離-正離子模式（ESI+）。
b)
檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。
c)
離子源電壓：5500 V；
d)
碰撞氣、氣簾氣、霧化氣和輔助氣均為高純氮?dú)?，使用前調(diào)節(jié)各氣流流量以使質(zhì)譜靈敏度達(dá)到檢測(cè)要求。
e)
去簇電壓和碰撞能量?jī)?yōu)化至最佳靈敏度。
6.2.1.2.2
在符合6.2.1.1和6.2.1.2的液相色譜條件和質(zhì)譜條件下，目標(biāo)物和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)譜參數(shù)和保留時(shí)間參見(jiàn)表1。
表
1 目標(biāo)物和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)譜參數(shù)和保留時(shí)間
目標(biāo)物
定性離子對(duì)
m/z
去簇電壓
V
碰撞能量
eV
保留時(shí)間
min
S（+）-苯丙胺
136.1＞91.1*
50
22
9.1
136.1＞119.1
11
R（-）-苯丙胺
136.1＞91.1*
50
22
10.3
136.1＞119.1
11
S（+）-甲基苯丙胺
150.1＞91.1*
50
23
11.7
150.1＞119.1
14
R（-）-甲基苯丙胺
150.1＞91.1*
50
23
13.0
150.1＞119.1
14
4-苯基丁胺（內(nèi)標(biāo)物）
150.1＞91.1*
60
15
10.1
150.1＞133.1
5
注：
帶*的離子對(duì)為定量離子對(duì)。
6.2.2 進(jìn)樣
分別吸取空白樣品提取液、檢材樣品提取液和添加樣品提取液，按6.2.1的條件進(jìn)樣分析。 記錄
記錄空白樣品、檢材樣品和添加樣品中目標(biāo)物可疑色譜峰的保留時(shí)間、質(zhì)譜特征離子對(duì)和離子對(duì)豐度比。 定性判斷依據(jù)
以保留時(shí)間、質(zhì)譜特征離子對(duì)峰和離子對(duì)豐度比作為定性判斷依據(jù)。
若檢材樣品中出現(xiàn)目標(biāo)物的兩對(duì)定性離子對(duì)的色譜峰，保留時(shí)間與添加樣品中相應(yīng)目標(biāo)物的色譜峰保留時(shí)間比較，相對(duì)誤差在±2.5%內(nèi)，且定性離子對(duì)豐度比與添加樣品的離子對(duì)豐度比之相對(duì)誤差不超過(guò)表2規(guī)定的范圍，則可判斷檢材樣品中檢出該種目標(biāo)物。
表
2 離子對(duì)豐度比的最大允許相對(duì)誤差
離子對(duì)豐度比
＞50%
＞20%～50%
＞10%～20%
≤10%
允許的相對(duì)誤差
±20%
±25%
±30%
±50%
7 定量分析 樣品前處理
移?。ɑ蚍Q(chēng)?。z材樣品尿液20 μL（或毛發(fā)20 mg）兩份，按6.1.1.1（或6.1.1.2）的方法操作。
另取空白尿液（或毛發(fā)）樣品若干份，添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作溶液適量，制得系列質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）或單點(diǎn)質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加樣品，與檢材樣品平行操作。目標(biāo)物的的相關(guān)資料見(jiàn)附錄A,相關(guān)信息及方法線性范圍、檢出限與定量限見(jiàn)附錄B。
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4
檢材樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）應(yīng)在工作曲線的線性范圍內(nèi)。配制單點(diǎn)質(zhì)量濃度（或
質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加樣品時(shí)，檢材樣品中目標(biāo)物質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）應(yīng)在添加樣品目標(biāo)物質(zhì)量濃度（或
質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的（100±50）%范圍內(nèi)。
儀器檢測(cè)
7.2.1 儀器條件
儀器條件應(yīng)符合6.2.1的規(guī)定。
7.2.2 進(jìn)樣
分別將檢材樣品、系列質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加樣品或單點(diǎn)質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加
樣品，按6.2.1的條件進(jìn)樣分析。
記錄與計(jì)算
7.3.1 基本要求
記錄檢材樣品、系列質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加樣品或單點(diǎn)質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加樣
品中目標(biāo)物及內(nèi)標(biāo)物定量離子對(duì)的峰面積值，然后計(jì)算質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
7.3.2 內(nèi)標(biāo)-工作曲線法
在系列質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的添加樣品中，以目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)物定量離子對(duì)的峰面積比值（Y）
為縱坐標(biāo)、目標(biāo)物質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)，C）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得線性方程。
根據(jù)檢材樣品中目標(biāo)物及內(nèi)標(biāo)物定量離子對(duì)的峰面積比值，按式（1）計(jì)算檢材樣品中目標(biāo)物的質(zhì)
量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
b
Y a
C
?
= ………………………………………………（1）
式中：
C——檢材樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)），單位為微克每毫升（μg/mL）或納克每毫克
（ng/mg）；
Y——檢材樣品中目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)物定量離子對(duì)的峰面積比值；
A——線性方程的截距；
B——線性方程的斜率。
7.3.3 內(nèi)標(biāo)-單點(diǎn)校正法
根據(jù)檢材樣品和添加樣品中目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)物定量離子對(duì)的峰面積比值，按式（2）計(jì)算檢材樣品中
目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
'A
A c
C
?
= ………………………………………………（2）
式中：
C——檢材樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)），單位為微克每毫升（μg/mL）或納克每毫克
（ng/mg）；
A——檢材樣品中目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值；
A′——添加樣品中目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值；
c——添加樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)），單位為微克每毫升（μg/mL）或納克每毫克
（ng/mg）。
7.3.4 計(jì)算相對(duì)相差
檢材樣品平行測(cè)定兩份，相對(duì)相差按式（3）計(jì)算。
RD ＝ 100 1 2
?
?
C
C C
%…………………………………（3）
式中：
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RD ——相對(duì)相差；
C1、C2 ——兩份檢材樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)），單位為微克每毫升（μg/mL）或納克每毫克（ng/mg）；
C—— ——兩份檢材樣品中目標(biāo)物質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的平均值（C1+C2）/2，單位為微克每毫升（μg/mL）或納克每毫克（ng/mg）。
8 分析結(jié)果評(píng)價(jià) 定性分析結(jié)果評(píng)價(jià)
8.1.1 陰性結(jié)果評(píng)價(jià)
陰性結(jié)果評(píng)價(jià)包括：
a)
若檢材樣品中僅檢出內(nèi)標(biāo)物，未檢出目標(biāo)物，且添加樣品中檢出目標(biāo)物，則陰性結(jié)果可靠；
b)
若檢材樣品中未檢出內(nèi)標(biāo)物，或添加樣品中未檢出目標(biāo)物，則陰性結(jié)果不可靠，應(yīng)按第6章的規(guī)定重新檢驗(yàn)。
8.1.2 陽(yáng)性結(jié)果評(píng)價(jià)
陽(yáng)性結(jié)果評(píng)價(jià)包括：
a)
若檢材樣品中檢出目標(biāo)物，且空白樣品無(wú)干擾，則陽(yáng)性結(jié)果可靠；
b)
若檢材樣品中檢出目標(biāo)物，空白樣品亦呈陽(yáng)性，則陽(yáng)性結(jié)果不可靠，應(yīng)按第6章的規(guī)定重新檢驗(yàn)。 定量分析結(jié)果評(píng)價(jià)
兩份檢材樣品中目標(biāo)物質(zhì)量濃度（或質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的相對(duì)相差不超過(guò)20%時(shí)，結(jié)果按兩份檢材樣品的平均值計(jì)算，否則應(yīng)重新測(cè)定。
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6
A
A
附錄A （資料性） S（+）-甲基苯丙胺、R（-）-甲基苯丙胺、S（+）-苯丙胺和R（-）-苯丙胺的相關(guān)資料
甲基苯丙胺和苯丙胺的S-對(duì)映異構(gòu)體中樞興奮作用均強(qiáng)于R-對(duì)映異構(gòu)體。有些治療藥物可代謝為甲基苯丙胺和苯丙胺，如用于治療帕金森病的司來(lái)吉蘭（Selegiline）可代謝為R（-）-甲基苯丙胺和R（-）-苯丙胺成分。
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B
B
附錄B （資料性） 目標(biāo)物的相關(guān)信息及方法線性范圍、檢出限與定量限
目標(biāo)物的相關(guān)信息及方法線性范圍、檢出限與定量限見(jiàn)表B.1。
表
B.1 目標(biāo)物的相關(guān)信息及方法線性范圍、檢出限與定量限
中文名稱(chēng)
英文名稱(chēng)
CAS號(hào)
檢材
線性范圍
μg/mL或ng/mg
檢出限
μg/mL或ng/mg
定量限
μg/mL或ng/mg
S（+）-苯丙胺
S（+）-Amphetamine
51-64-9
尿液
0.05～50
0.02
0.05
毛發(fā)
0.1～200
0.05
0.1
R（-）-苯丙胺
R（-）-Amphetamine
156-34-3
尿液
0.05～50
0.02
0.05
毛發(fā)
0.1～200
0.05
0.1
S（+）-甲基苯丙胺
S（+）-Methamphetamine
537-462-2
尿液
0.05～50
0.02
0.05
毛發(fā)
0.1～200
0.05
0.1
R（-）-甲基苯丙胺
R（-）-Methamphetamine
33817-09-3
尿液
0.05～50
0.02
0.05
毛發(fā)
0.1～200
0.05
0.1
